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livetissue活肿瘤组织冻存复苏试剂盒

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品牌: sciencelight
货号: LT-2601/LT-2602
单价: 面议
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发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
所在地: 中国 上海
有效期至: 长期有效
最后更新: 2016-09-20 13:48
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产品详细说明
 组织冻存试剂盒使用说明书

活肿瘤组织冻存试剂盒(LT2601)

组织冻存管 X3  

组织支架 X3

组织冻存液:

     No.1 玻璃化液 1(V1) …………. 1X10ml 管

     No.2 玻璃化液 2(V2) …………. 1X10ml 管

组织冻存流程: 清洗、处理组织→玻璃化液 1、2→液氮玻璃化→储存

自备材料:

1. 生理盐水/1XPBS 2. 眼科剪 3. 眼科镊 4. 有齿镊 5. 平口镊 6. 组织处理模具及配套刀片(LT2603) 7. 无菌液氮 8. 无菌液氮盒 9. 秒表或计时器 10. 100mm 培养皿 X4 11. 无菌纱布 12. 水浴锅

操作步骤:

a. 在组织冻存管上记录清楚肿瘤组织的相关信息;

b. 水浴加热并维持玻璃化液 1、玻璃化液 2 为 26℃; 注意:在后续使用玻璃化液 1、玻璃化液 2 时,维持液温为 26℃,有利于提高组织复苏后 的存活率。

c. 在 100mm 培养皿中,用生理盐水清洗肿瘤组织,使用眼科剪、眼科镊修剪 去除血管、包膜以及坏死组织;

d. 使用组织处理模具将肿瘤组织切成 1mm 厚的薄片; 注意:经验证,组织切片的最佳厚度为 1mm。

e. 在 100mm 培养皿中,用生理盐水再次清洗切好的组织,并用无菌纱布吸除 组织表面的液体;

f. 使用平口镊将肿瘤组织切片浸入 V1 管中的 10ml 玻璃化液 1 中,26℃, 25min ;

g. 将 V1 管中的液体及组织切片全部倒入 100mm 培养皿中,在移入 V2 管前使 用无菌纱布尽量将组织表面的玻璃化液 1 吸除; 注意:尽量减少组织切片从玻璃化液 1 移入玻璃化液 2 之间的操作时间。

h. 使用平口镊将组织切片移入 V2 管中的 10ml 玻璃化液 2 中,26℃, 15min 或 者待组织切片自然沉降至管底;

注意:如果组织切片在 15min 内没有自然沉降至 V2 管的管底,等待至其沉至管底;如果组织切片早于 15min 沉至管底,让组织切片在 V2 管内浸泡至少 15min。

i. 将组织切片平铺摆放于组织支架上;

j. 将组织支架平放于无菌纱布上,尽量吸除组织切片表面的液体;

k. 使用有齿镊将组织支架快速浸入无菌液氮,时间不少于 5min; l. 快速将组织支架移入组织冻存管内,旋紧冻存管,将冻存管移入液氮罐中保 存。

注意:在组织支架移入组织冻存管前,检查组织切片是否透明,透明的组织切片意味着组 织切片成功被玻璃化。  


LiveTissue 复苏试剂盒使用说明书

活肿瘤组织复苏试剂盒(LT2602)

组织复苏液:

 No.1 复苏液 1 (T1) ………………… 1X30ml 管

 No.2 复苏液 2 (T2) ………………… 1X10ml 管

 No.3 复苏液 3 (T3) ……………… 1X10ml 管    

 No.4 复苏液 4 (T4) ……………… 1X10ml 管

自备材料:

1. 有齿镊 2. 平口镊 3. 无菌液氮 4. 无菌液氮盒 5. 秒表或计时器 6. 100mm 培养皿 X3 7. 水浴锅

操作步骤:

a. 水浴加热并维持复苏液 1 为 37℃,复苏液 2、3、4 为 26℃; 注意:在后续使用复苏液 1 时维持液温为 37℃,复苏液 2、3、4 时维持液温为 26℃, 有利于提高组织复苏后的存活率。  

b. 使用有齿镊在液氮中旋开组织冻存管并取出组织支架;

c. 迅速将组织支架沉浸入 37℃的复苏液 1 ,并不断轻摇 T1 管,待组织切 片从组织支架上脱落后,取出支架,让组织切片浸泡 3min; d. 将 T1 管中的液体及组织切片全部倒入 100mm 培养皿中,使用平口镊将组 织切片移入 T2 管中的 10ml 复苏液 2 中,26℃,5min; e. 将 T2 管中的液体及组织切片全部倒入 100mm 培养皿中,使用平口镊将组 织切片移入 T3 管中的 10ml 复苏液 3 中,26℃,10min; f. 将 T3 管中的液体及组织切片全部倒入 100mm 培养皿中,使用平口镊将组 织切片移入 T4 管中的 10ml 复苏液 4 中,26℃,10min,即获得复苏后 的肿瘤组织; g. 用生理盐水冲洗后即可移植于免疫缺陷小鼠体内建立 PDX 模型,或用于 其他研究。

注意:尽量减少组织切片从一种复苏液移入另一种复苏液之间的操作时间。

 
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