FDA是一种非荧光性疏水性荧光素衍生物,它可以穿透细胞膜进入细胞,通过细胞内酯酶催化水解二乙酸酯基团产生具有高强度的荧光产物荧光素。荧光分子在具有完整细胞膜的细胞内积累,因此这种绿色荧光可以作为一种细胞活力的标签。不具有完整细胞膜或者新陈代谢活性的细胞,不能在细胞内积累荧光产物,因此不能显现绿色荧光。FDA可以与染料PI联合使用,无活性的死细胞被PI着色,发出红色荧光;有活性的细胞PI无法着色,在FDA作用下,紧发出绿色荧光。这两种颜色可以很好的辨别死细胞与活细胞,与单一颜色检测相比,它提供了一种更为准确的活细胞定量检测方法。