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Renilla luciferase之底物腔肠素Coelenterazine

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品牌: sciencelight
货号: luc006
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最后更新: 2016-09-20 13:42
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公司基本资料信息
 
 
产品详细说明
 Renilla luciferase之底物腔肠素Coelenterazine

CAS 编号:55779-48-1

货号:luc006

分子式:C26H21N3O3  

分子量: 423.48g/mol

纯度:98%

保存:-20°C避光,保存在惰性气体下

Coelenterazine,在水生生物中(例如海肾、海蜇、水螅等)发现的天然腔肠素可作为很多荧光素酶(包括海肾荧光素酶Rluc)的作用底物,可用于活细胞中钙离子浓度检测、报告基因分析、BRET(生物发光共振能量转移)研究、ELISA、HTS、组织或细胞中超氧阴离子和过亚硝酸盐的化学发光检测。

与甲虫荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。目前研究得最透彻的以腔肠素为底物的荧光素酶来源于海肾(Renilla), 即海肾荧光素酶 (Renilla Luciferase,简称Rluc)。  活体成像实验中除FireflyLuciferase外,有时也会用到Renilla Luciferase(海肾荧光素酶,编码基因是Rluc),底物正是coelentarizine。作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物, 并在此过程中发射蓝色光,所发的光波长在 460~540nm左右。发光的波长低于firefly luciferase的,而且特异性也不好。但是,如果实验设计需要标记两种细胞(比如一种肿瘤细胞和一种干细胞)或者标记一种细胞一种基因,就需要有两种可以分别检测的报告基因。Firefly luciferase和renilla luciferase正好可以满足这样的要求,可以分别用不同的底物(D-luciferin,potassium salt和Coelenterazine)分别激活发光。

 

腔肠素也是以水母发光蛋白为代表的海洋发光蛋白的辅助因子。在一个以荧光素/荧光素酶系统为基础略作改变的系统中,水母发光蛋白稳定的结合了处于反应状态的腔肠素,氧化反应在水母发光蛋白与钙离子结合后开始进行。这种对钙离子的反应是不依赖于氧气的,水母发光蛋白所发射的蓝色光的量和酶浓度及Ca++ 浓度成正比。这种特性使得腔肠素可作为荧光素酶、氧气及钙离子的检测试剂。 水母发光蛋白/腔肠素系统与荧光钙离子指示剂相比,在检测钙离子方面具有以下优点: 可检测较大范围的钙浓度 – 从0.1uM 至 >100uM;样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂;虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。由于水母发光蛋白复合体不会被运输到细胞外,所以可进行数小时至数天的钙离子的观测。

 

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