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泰克生物是一家专业的CRO服务提供商,目前在建5000平米的GMP研究中心,能为我们的客户提供高质量的哺乳表达定制服务。
全套Gibco无血清哺乳细胞培养,配合来源清晰的293F,CHO悬浮细胞系,整个体系满足于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求,如糖基化修饰,磷酸化修饰等。为客户提供的全套高性价比研究服务满足GMP-like体系,包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定,动物源成分的质控,标准化细胞培养与转化操作流程,全套GE提供的纯化填料和设备等准则进行生产的重组蛋白。
为了配合高质量的抗体发现服务,泰克生物建立了一套完整的蛋白体外哺乳重组表达,蛋白发酵与纯化,QC控制的体系。我们的科学家均来自生物制药企业,拥有多年的人用蛋白类药物开发经验,在深入学习和了解GMP规则下,严格按照QC质量控制体系, ICH和GMP指导原则进行重组蛋白类产品的开发,并为客户提供个体化且高质量的重组蛋白定制服务。
图1 重组抗体(蛋白)发现示意图
经过大量的实践可知,要获得优质的抗体药候选序列,前期免疫抗原的制备具有倾向性,我们认为哺乳体系表达的全长蛋白免疫效果优于原核体系重组表达的全长蛋白(某些细胞因子除外),因此我们为客户提供基于高密度Expi 293F和CHO-S体系的蛋白表达定制化服务,以满足后期动物免疫,重组抗体筛选与性能鉴定的需求。目的蛋白体外重组表达流程与时间如表所示:
步骤 |
具体服务内容 |
周期 |
基因克隆及载体构建 |
* 扩增/鉴定基因片段或合成目的基因,插入哺乳动物细胞表达质粒 * PCR及测序检测确定亚克隆基因 * 交付:测序数据和实验方案 |
1-2周 |
瞬时蛋白表达 |
* 重组质粒转染细胞(293F,CHO) :瞬时表达 * SDS-PAGE和WB检测 * 交付:表达结果和实验报告,0.02-5mg,纯度>90% |
12-14周 |
稳定表达(可选) |
* 重组蛋白CHO或293F稳定表达细胞系构建和筛选 * 交付:稳定细胞系,构建报告;边际产物,3个克隆,每个克隆50ml发酵产物 |
12–14周 |
小规模蛋白表达 |
* 少量表达及表达条件优化:1-5L的小规模蛋白表达 * 交付:优化报告,培养条件和全部重组蛋白 |
3-4周 |
█ 服务优势
✔ 密码子优化:包含稀有密码子分析,蛋白亲水性分析和跨膜结构域的预测分析
✔ 多种融合标签载体和宿主,以保证高可溶蛋白表达和高蛋白活性
✔ 高活性表达:实现复杂的糖基化修饰和磷酸化修饰,具有完整的空间结构特征
✔ 多重表达模式:稳定表达和瞬时表达
✔ 低内毒素水平:LAL检测法<0.1EU/ug
✔ 完整的GMP-like文件支撑体系,保证您的产品所有材料、试剂和制备信息可追溯