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CAR先导抗体分子发现服务

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  • 发布时间:2023-07-06产品供应时间:长期有效

所在地:中国天津

企业类型:企业单位

公司地址:天津市武清区国际企业社区A5号楼

联系人:江志华 (先生)
手机:18920585432
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企业信息
  • 泰克生物科技(天津)有限公司
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  • 企业规模:1-49人
  • 企业类型:企业单位
  • 经营模式:制造商,服务商
  • 经营范围:提供基于噬菌体展示和纳米抗体研发平台的定制服务
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泰克生物是由一群深耕于抗体药物发现方面的专家组成的团队,平均项目经验超过10年,建立了完善的基于噬菌体展示技术平台的抗体药物候选分子发现平台,能够为客户提供一系列跟治疗性生物大分子发现相关的服务,包括但不限于VHH抗体、scFv抗体和Fab抗体发现,CAR-T先导抗体序列设计,CAR-NK先导抗体序列设计等服务。经过10年左右的发展,泰克生物在抗体噬菌体展示技术平台的基础上,引入了单B细胞测序技术,能够更加快速的为客户提供高质量抗体先导序列的发现服务。

CAR-T疗法是指嵌合抗原受体T细胞免疫疗法,英文全称Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy(CAR-NK类似,只是将T细胞更换成NK细胞)。这是一种治疗肿瘤的新型精准靶向疗法,近几年通过优化改良在临床肿瘤治疗上取得很好的效果,是一种非常有前景的,能够精准、快速、高效,且有可能治愈癌症的新型肿瘤免疫治疗方法。

T细胞也叫T淋巴细胞,是人体白细胞的一种,来源于骨髓造血干细胞,在胸腺中成熟,然后移居到人体血液、淋巴和周围组织器官,发挥免疫功能。技术人员通过基因工程技术,将VHH抗体基因,scFv抗体基因通过合适的方法,如慢病毒包装方式转入到T细胞中,通过VHH或scFv的膜定位表达,即给T或NK细胞定制了一套特殊的针对特异性肿瘤的定位导航装置CAR(肿瘤嵌合抗原受体),即CAR-T细胞,利用其“定位导航装置”CAR,专门识别体内肿瘤细胞,并通过免疫作用释放大量的多种效应因子,从而高效地杀灭肿瘤细胞,达到治疗恶性肿瘤的目的。

相比于传统scFv抗体(来自普通的IgG抗体),来自驼源动物的VHH抗体(又称为重链抗体)分子量约为15kDa,具有更强的稳定性,现在被广泛的应用于CAR-T的先导抗体开发。泰克生物通过自有羊驼基地,能为客户提供背景纯净,来源清晰的健康羊驼进行纳米抗体(VHH抗体)发现服务。


█ 羊驼VHH抗体

 

羊驼抗体只具有重链不含轻链,因此被称为重链抗体(heavy Chain Antibody,hcAb),如图1中D所示,羊驼抗体缺少轻链,由4个HC和2个VH组成,其中VH区域又被称为纳米抗体或单域抗体(single domain antibody,sdAb)。独立的羊驼VH区域具有完整的抗原结合能力,同时不像人工改造的单链抗体片段(single chain Fv,scFv),容易聚集。和传统抗体相比,羊驼抗体具有稳定的性质,例如在60℃仍能保持活性,抵抗极端的pH环境。

目前泰克生物成功建立了来自300只羊驼的天然噬菌体抗体展示文库,有效库容量达到1010,通过该文库的筛选,能够缩短羊驼单抗的制备周期。同时,采用不同的筛选策略,如抗原递减法,结合我司的蛋白重组表达平台,能够为客户提供达-5g/L水平的重组抗体表达发酵服务,在很大程度上提高了抗体批间一致性和稳定性。


CAR候选分子发现服务+泰克生物1.png

图1 A,传统IgG;B,传统抗体Fab片段;C,传统抗体的单链scFv片段;D,重链抗体或驼类抗体;E,驼类抗体的VH区域或单域抗体(sdAb)


█ 制备流程

 

CAR候选分子发现服务+泰克生物2.png

图2 基于噬菌体技术平台的驼源VHH抗体发现服务


█ 服务内容 


步骤

服务内容

交付材料

周期

半抗原改造

客户提供小分子结构式和CAS号

改造后的小分子衍生物LC-MS、NMR的鉴定结果

3-4

完全抗原制备

BSA、KLH和OVA偶联小分子

完全抗原SDS- PAGE、UV、ELISA(需客户提供一抗)或MALDI-TOF鉴定结果

3个工作日

重组蛋白免疫原

需要客户(或委托泰克生物进行制备)提供3.5mg,纯度>85%

鉴定报告

具体分析

噬菌体抗体库的制备

抗原乳化,免疫1只羊驼4-5次

PCR结果,免疫检测结果(含ELISA的效价和特异性检测结果),实验记录

3-4个月

收集脾细胞(或者外周血淋巴细胞),可变区基因分离

噬粒构建,转染表达,文库构建,文库筛选

重组抗体表达

抗体筛选,构建表达质粒,真核或原核表达重组抗体

产品和报告

4-5


█ CAR-T 细胞疗法的研发流程

 

CAR候选分子发现服务+泰克生物3.png


图3 泰克生物CAR-T/NK项目服务流程


针对CAR-T/NK我们能够提供的额外增值服务:

(1) CAR表达测试

(2) 靶点蛋白与先导抗体抗原识别区专属性

(3) 针对先导抗体抗原识别区的抗独特性(Anti-idiotype)测试

(4) 针对不同靶点蛋白的Fab形式抗体抗原识别区检测

(5) 细胞因子释放试验

a) 细胞因子种类:ɣ链共受体家族、IL-12家族、IL-1超家族等

b) 方法:酶联免疫斑点试验(ELISpot)、细胞内细胞因子染色试验(ICS)、流式细胞术等

(6) 体外细胞毒性试验

泰克生物能够提供体外细胞毒性试验,以验证评估CAR-T细胞的细胞毒性和可能的不良反应。例如,CAR-T细胞疗法可能会引起的一些急性的靶向/肿瘤毒性(细胞因子释放综合征、肿瘤溶解综合征)或靶向/非肿瘤毒性,以及由于CAR-T细胞经历抗原-独立增殖可能会增加细胞介导的毒性而导致的CAR-T细胞永生失败。

(7) CAR细胞增殖试验

泰克生物开发的第二代和第三代CAR产品,能够增强CAR-T细胞或NK细胞增殖的持久性,并且泰克生物能够通过不同的测定方法对这种活化和增殖过程进行评估,例如 MTT、MTS、细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)、5,6-羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯 (CFSE) 结合流式细胞术分析等技术。

(8) 活力和生物分布分析

泰克生物能够提供活力和生物分布分析,以验证评估CAR-T细胞在生理条件下的正常增殖能力,为 CAR-T细胞疗法提供临床前服务。例如,针对CAR-T细胞有限的复制寿命而导致的疗效减弱的CAR-T细胞疗法障碍,活力和生物分布分析为CAR-T细胞的长期治疗效果评估提供重要支持。


█ 服务优势


用成熟的羊驼免疫程序结合噬菌体展示技术,构建驼源免疫抗体库,筛选得到高亲和力和特异性的单克隆抗体

 丰富的经验积累,成熟的技术路线,保证产品质量稳定可靠

 严格的质控体系:标准硬件设施平台,满足cGMP的文件关键管理规则,可提供手写实验记录本

能克服传统方法难以解决的靶点、副作用大等问题,是理想的抗体药制备来源

 提供单克隆抗体大规模生产服务,满足工业化生产需求

 完整的上下游服务:提供从抗原制备、噬菌体文库构建羊驼免疫、抗体筛选到抗体人源化等一体化服务

 服务可定制:根据客户需求制备,为每一个客户量身定制实验方案,满足每一位客户的特殊需求

关键词:CAR先导抗体分子发现服务,提供服务,技术服务,生物技术服务,分子生物学服务
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