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嵌合抗体（Chimeric Antibody）是指来源于一种物种的抗体可变区与另外一种物种的恒定区片段进行嵌合后形成完整的IgG抗体，如人-鼠，人-兔，鼠-兔，人-羊驼嵌合抗体等。不同物种的嵌合抗体改造主要是为了改善亲本抗体的免疫原性，种属特性，半衰期等特性，其核心诉求是获得抗体的可变区序列，借助于噬菌体展示技术和酵母抗体展示技术，可以发现多种物种的单克隆抗体，进而获得不同来源的嵌合抗体。
2014 年，WHO（世界卫生组织）发布了新指南，重新定义了不同类别的治疗性抗体。其 INN（国际非专有名称）抗体药物命名法将治疗性抗体分为 3 类：嵌合型或"-ximab，人源化或"-zumab，全人源或"-umab。
根据世卫组织命名法对特定抗体进行分类，来源于小鼠（或更普遍的非人类）序列的抗体将被归类为-祖马抗体，而来源于人类（噬菌体展示、转基因小鼠或 B 细胞克隆技术）的抗体将被归类为-乌马单抗。在一个标准项目中，与 IMGT 数据库进行 BLAST 的小鼠抗体通常会在 VL 结构域显示出与最接近的人类种系约 65-80% 的同一性，在 VH 结构域显示出 60-75% 的同一性。因此，要想在 VH 结构域达到所需的同一率，通常需要对 CDR 中的一些残基进行突变。因此，在人源化过程中需要对 CDR（根据 Kabat 的定义）进行突变，以达到 VH 结构域 85% 的同一性。
泰克生物是一家专业的嵌合抗体的构建与生产公司，拥有成熟的重组抗体哺乳表达平台，能为客户提供高质量的嵌合抗体表达定制服务。全套Gibco无血清哺乳细胞培养，配合来源清晰的293F，CHO悬浮细胞系，整个体系满足于不同客户对天然构象蛋白的体外重组表达需求。泰克生物为客户提供的全套高性价比研究服务满足GMP-like体系，包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定，动物源成分的质控，标准化细胞培养与转化操作流程等。
█ 嵌合抗体的分类
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嵌合抗体种类 |
简介 |
嵌合原理 |
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嵌合IgG抗体 |
在免疫过程中，抗体Fc段能与效应细胞发生相互作用，从而发挥特异的生物学功能；IgG1和IgG3与Fc受体的结合能力最强，IgG4次之，IgG2几乎检测不到结合。 |
构建嵌合抗体首先需从生产鼠源单抗的杂交瘤细胞中得到V区基因，再与人类的C区基因重组并克隆到合适载体中，然后转入受体细胞表达。 |
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嵌合Fab和F（ab'）2抗体 |
该种抗体最大的优势是渗透力强，由于该类型抗体的亲和力较低，分子量小，很容易被肾小球过滤而从血液中消失，因此，大多数不适合单独用于临床治疗。 |
将功能性抗体L，H链的V区基因与人的轻链K和H进行重组，然后再转入宿主细胞中表达。 |
█ 人鼠嵌合抗体构建策略
1.模板替换：与鼠对应部分有较大同源性的人抗体FR替换鼠FR，利用已有晶体结构数据的人源抗体的可变区框架（VH如NEW，KOL，VL如REI等)用作替换的基本模板或在已有的抗体序列库中搜寻与鼠McAb FR有最大同源性的人源FR用于替换。
2.表面重塑：对鼠CDR及FR表面残基进行镶饰（veneering）或重塑（resurfacing），以使之类似于人抗体CDR的轮廓（profile）或人 FR 的型式。
3.补偿变换：在人FR选择与CDR有相互作用、与抗体的亲和力有密切关系或对FR空间结构折叠起关键作用的残基进行改变，以补偿完全的CDR移植。
4.定位保留：人源化McAb保留了鼠源McAb可变区中参与抗原结合的氨基酸残基，包括CDR和FR中的一些关键残基。
█ 嵌合抗体设计与表达服务周期
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步骤 |
服务内容 |
周期 |
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基因克隆及载体构建 |
* 扩增/鉴定基因片段或合成目的基因，插入哺乳动物细胞表达质粒 * PCR及测序检测确定亚克隆基因 * 交付：测序数据和实验方案 |
1-2周 |
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瞬时蛋白表达 |
* 重组质粒转染细胞(293F， CHO) ：瞬时表达 * SDS-PAGE和WB检测 * 交付：表达载体，克隆菌株，重组抗体，纯度>85% |
2–3周 |
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稳定表达（可选） |
* 重组蛋白CHO稳定表达细胞系构建和筛选 * 交付：稳定细胞系，构建报告；边际产物，3个克隆，每个克隆50ml发酵产物及纯化产物 |
12–14周 |
█ 泰克服务优势
✔ 可变区多种属选择：人、小/大鼠、犬、鸡、骆驼等
✔ 免费重组嵌合抗体表达方案设计
✔ 有自主优化的HEK293/CHO平台能够进行更好的糖基化及翻译后修饰
✔ 自主设计哺乳体系表达载体
✔ 过重规格的放大表达体系可供选择
✔ 恒定区有多种属选择：人、大/小鼠、犬、恒河猴、兔等
✔ 具有多亚型构建的经验：IgG、IgA、IgM和IgE
