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目的和原理
尽管胃不是药物的主要吸收场所,还是有某些由胃粘膜吸收的报道,用大鼠胃瘘技术直接测定胃的药物吸收。
操作步骤
雄性 wistar大鼠,体重220~300g,50mg/kg Pentobarbital i.p.麻醉,颈静脉插管,用以给予肝素化盐水(3000IU/kg)和实验过程中替换全血。实验前立即从肝素化供血大鼠采集替换血。在颈动脉作另一插管,用以收集循环血液样品。上腹部正中切口,注意结扎止血,用丝线结扎右侧胃网膜动静脉分支,然后用丝线结扎胃和左肝小叶后韧带,分离尾肝小叶,剪断结扎胃脾系膜用纱布将肝小叶拖出手术野,用合适号码缝线结扎胃血管和食管,然后结扎责门和贲门血管,前胃切口以使胃内容物移出。
温生理盐水清洗胃瘘,汲干液体。将一改良的带卡口的三通接头插人上述切口并结扎,用注射器经三通给药。将胃瘘推至右位,暴露左胃静脉,在其与牌静脉交界处插管,用21- gauge针头与一条15cm长的PE管相连(内径,0.75mm,外径,1.45mm)。用带有泡沫橡胶的夹子夹住,以防操作时脱落。将药物注入胃内,并在一定时间间隔内由胃瘘取血,测定血容积,称重并用血球容积器(HCT)指读,并依公式转换成单位。
血细胞和血浆密度测定值由4只大鼠的五次测定获得。血样本于3000g离心10min:取自胃瘘的血样品放置冰上直至血浆可在3000g离心10min分离,血浆在分析冷冻前保存。
以0.7 ml/min的速率置换血液,血液来自于用蠕动泵温和振荡的贮液器。
0.5m待试化合物注入胃瘘。用特异检测方法测定该化合物的血浆水平。在30~60min期问,每4min收集一次血浆样品,试验结束后,收集胃瘘内液体测定胃内药物残留量。
结果评价
计算4-6个实验的血浆浓度的均值土SD,并图示不同时间吸收状况。
MDL服务项目
动物实验相关、WB、IP和Co-IP服务、细胞增殖、细胞培养、细胞周期凋亡、平板克隆、免疫荧光、免疫组化、常规及特殊染色、包埋切片爬片、硬组织切片机、定量pcr、elisa检测服务、普通生化试剂盒检测、全自动生化检测项目等。
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