酵母蛋白表达系统

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背景介绍

酵母表达系统兼有原核和高等真核系统的优点，培养条件简单、生长速度快、表达水平高、操作简便、成本低廉，蛋白翻译后能进行正确加工、修饰，合理的空间折叠，使得蛋白的可溶性得到提高，是理想的重组真核蛋白生产制备工具。

安必奇具有丰富的酵母蛋白表达的经验，成功表达出超过100种重组蛋白。并且我们具有筛选酵母表达高拷贝菌株的服务，可以满足客户的多种特殊需求。我们利用酵母表达系统成功表达过具有二硫键蛋白及糖基化蛋白，使蛋白具有类似天然的结构和翻译后修饰，保证了蛋白的活性。

酵母系统表达的过程中，对诱导时间及温度的控制，对培养条件和菌株生长周期的把握直接影响到重组蛋白表达的成败，安必奇的技术人员对整合流程把握和控制，提高表达的成功率及表达水平。

服务优势
·高生产率：独特的分泌信号序列保证了重组蛋白的大分泌量。
·两种表达体系可供选择：可选择组成性表达或者诱导表达两种体系。
·大规模生产：高达500L的生物反应器保证克级水平蛋白的生产。
·多种菌株和载体可供选择：我们提供包括X33, GS115, SMD1168等多种菌株和多种载体。

服务项目及流程

1. 密码子优化
   安必奇的密码子优化技术，涉及基因合成、载体构建、基因保证转录、mRNA翻译、翻译后修饰等环节。

2. 重组酵母表达质粒构建、目的基因的亚克隆和重组质粒电转化进入表达菌株

3. 鉴定筛选高表达菌株
   通过PCR方法确定阳性转化株， SDS-PAGE电泳检测培养上清中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。

4. 蛋白表达分析鉴定。

5. 蛋白表达条件的优化。
   挑选阳性克隆进行常规表达筛选，并对其中表达最好的菌株优化表达条件。对挑选出来的单克隆菌株，优化培养及诱导条件（培养基，菌体密度，甲醇浓度，诱导时间等），提高目标蛋白的表达量。

6. 大规模蛋白表达和纯化。

7. 蛋白鉴定。
   利用定性或者定量分析的方法进行蛋白质鉴定。