单一/混合蛋白质分离纯化方法与质谱鉴定详解

单一/混合蛋白质分离纯化方法与质谱鉴定详解-详情文章导读• 单一蛋白质样品的分离、纯化？• 单一蛋白质的质谱鉴定？• 蛋白质混合物质谱鉴定方法？对于单一蛋白的常用鉴定方法，大家肯定立马想到免疫印迹法（Western Blot）。Western Blot是通过抗体和目标分子的特异性结合从而对目标蛋白进行鉴定，但是这种方法是适用于对已知蛋白进行鉴定，并且必须借助抗体，所以不适用于对未知或者没有相应抗体的蛋白进行分析。那么小伙伴们

四种色谱分离技术

四种色谱分离技术-详情色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，zuì终达到分离的效果。色谱类型根据分离机理的不同，色谱可分为五种类型：吸附、分布、交换、排阻和亲和。色谱分离方法包括吸附色谱、键合相色谱、离子交换色谱、亲和色谱和尺寸排阻色谱。色谱的物理化学原理（Broekaert J et al.,2015）几种色谱分离技术的比较亲和色谱亲和

差示热分析法

差示热分析法-详情差示热分析法差示热分析法（Differential Thermal Analysis，简称DTA）是zuì流行的热分析技术之一，与差示扫描量热法DSC非常相似。差示热分析法将要研究的材料和惰性参照物都编程为经历相同的热循环，同时记录被测样品和参照物之间产生的温差，然后绘制记录的温差随时间或随温度变化的曲线（DTA曲线/热谱图）。相对于惰性参照物，样品的任何热通量，无论是放热的还是吸热的，都可以被识别和检测。因此，分析人员

动态力学DMA分析

动态力学DMA分析-详情动态力学分析（Dynamic Mechanical Analysis，简称DMA）是一种分析技术，被广泛地应用于探索和表征材料，尤其是用于研究各种聚合物（如塑料和橡胶等）的粘弹性行为。动态力学DMA分析原则上，随着温度随时间的变化，会在聚合物样品上施加一个很小的波动的机械正弦应力，在被测材料中产生的应变可以被测量，从而确定复模量。试样的温度和应力的频率通常随程序设定而变化，从而导致复合模量的变化。基于测得的力

差示扫描量热法

差示扫描量热法-详情差示扫描量热法（DSC）是一种用于确定受控温度范围内被测样品与参考样品之间热流率差异的技术。该分析过程是在一个封闭的系统中实现的，该封闭系统与周围环境之间通过边界隔离，只有热量和能量可以流动，而质量不能通过边界流动。差示扫描量热法可以在恒定压力或恒定体积下进行，这使分析人员可以监测由所研究的反应引起的温度变化。差示扫描量热法DSC常用于：1，获取未知材料的性质和成分信息；2，研究样品纯

荧光光谱分析

荧光光谱分析-详情荧光光谱法（又称荧光分析法或分光荧光测定）是一种电磁光谱法，可以测量样品吸收光子后发出的光子强度。实际上，大多数荧光分子是芳香族的，如蛋白质/肽中的色氨酸。光学技术，如UV-Vis、圆二色谱（CD）、傅立叶变换红外（FTIR）和荧光光谱，都被用于获取被测化合物的结构、相互作用和动力学信息。荧光光谱是研究溶液状态和显微镜下蛋白质/肽的实时结构和动力学的重要研究工具。荧光光谱分析生物制药，特别是蛋

傅立叶变换红外光谱（FT IR）分析

傅立叶变换红外光谱（FT IR）分析-详情傅立叶变换红外光谱（FT IR）是一种强大的技术，可用于获取吸收/排放固体、液体或气体的红外光谱。当红外辐射穿过被测样品时，一部分红外辐射会被官能团的特定共价键吸收，另一部分红外辐射则直接穿透收集到的光谱代表了分子的吸收和传输，形成了用于化学鉴定的分子指纹。这也使得红外光谱可用于多种类型的分析。傅立叶变换红外光谱仪同时收集宽波长范围内的高分辨率光谱，这与色散光谱仪相比

动态光散射（DLS）分析

动态光散射（DLS）分析-详情动态光散射（Dynamic light scattering, DLS），也称光子相关光谱法（photon correlation spectroscopy, PCS）或准弹性光散射（quasi-elastic light scattering, QELS），是用于确定溶液样品中悬浮体或聚合物中颗粒尺寸和半径分布zuì常用的分析方法之一。在DLS的范围内，通常通过强度或光子自相关函数（ACF）分析时间波动。单色光束（例如激光）照射到含有以布朗运动形式移动的球形粒子的测试溶液中

内源性大麻素分析服务

内源性大麻素分析服务-详情内源性dà麻素是由神经系统中的磷脂合成的两性分子。它们与G蛋白偶联受体一起形成内源性dà麻素系统。研究zuì深入的内源性dà麻素是N-花生四烯酸乙醇酰胺（anandamide）和2-花生四烯酰甘油（2-AG）。它们由酰胺或酯头组成，并与花生四烯基链连接。内源性dà麻素主要通过与dà麻素受体或TRP通道结合来实现其生理活性。内源性dà麻素在其经典受体拮抗剂的存在下与许多膜蛋白相关，这表明内源性dà麻素可以

氨基酸及其衍生物

氨基酸及其衍生物-详情BTP-氨基酸及其衍生物代谢相关物质分析氨基酸是生物学上重要的有机化合物，由胺（-NH2）和羧酸（-COOH）的官能团组成，以及一个侧链连到每一个氨基酸。氨基酸分析是蛋白质，肽和其他氨基酸组成的药物分析中的一个基础工具。氨基酸分析允许对样品的氨基酸组成进行定量及定性分析，并能够实现对可能存在于蛋白质及多肽中的非典型氨基酸进行测定。百泰派克公司采用GC/MS（Agilent 7890A/5975C）和LC/MS/MS（AB S

蛋白里面检测磷酸化是什么意思

蛋白里面检测磷酸化是什么意思？蛋白里面检测磷酸化即针对磷酸化蛋白质进行全面的分析，包括对磷酸化的鉴定、定位和定量。可解析关键蛋白的磷酸化水平变化规律，从分子水平揭示机体重要性状和代谢途径的调节机制。蛋白磷酸化由蛋白激酶（protein kinase）催化完成。蛋白激酶将供体ATP（少数情况下）上的γ位磷酸基团以酯键的形式连接到底物蛋白的特定氨基酸链的羟基上。真核生物蛋白被磷酸化的氨基酸主要包括丝氨酸、苏氨酸和酪氨

基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪测试样品要求

基质辅助激光解吸-飞行时间质谱仪（MALDI-TOF）由基质辅助激光解析离子化源和飞行时间质量检测器组成。MALDI-TOF-MS采用基于基质的软电离技术，将待检测的样品变成气态离子而不发生碎裂或分解，分辨率高，检测范围宽，特别适合蛋白质、核酸、脂质和糖类等生物大分子的分子量检测。制备MALDI-TOF检测的样品需要注意样品状态、样品量、浓度和缓冲液等方面，以蛋白质为例，具体要求如下：1、样品状态：蛋白/多肽粉末或溶液均可；2、样

单细胞质谱流式技术分析

随着现代生物学的发展，“平均值”这个词已经不能满足我们的研究需要了，我们需要更进一步了解细胞之间的差异性，于是针对单细胞的各类研究技术应运而生。单细胞质谱流式（Mass Cytometry）技术是利用质谱技术对单细胞进行多参数检测的流式技术，它既有传统流式细胞术能够高速分析的特点，又兼并了质谱检测的高分辨能力。单细胞测序和质谱流式都是目前非常强大的技术，越来越多的高分文献都是将两者结合使用，两者不能说有优劣之分

蛋白质圆二色谱分析

蛋白质分子中存在不对称的二级构象，如α-螺旋、β-折叠、β-转角等立体结构，这使得蛋白质分子对左、右圆偏振光的吸收也不同，经左、右圆偏振光透过后变成椭圆偏振光，这种现象被称为蛋白质的圆二色性。圆二色谱（circular dichroism，CD）即是利用溶液中的光学活性分子（如蛋白质、DNA）的圆二色性解析其二级、三级构象的一项重要技术，目前被广泛应用于大分子立体结构与功能、相互作用的研究中。 百泰派克公司提供专业的圆二色

蛋白质组学分析策略

蛋白质组学分析包括分析蛋白质的结构和功能、翻译后修饰情况、蛋白质定位、蛋白质表达情况以及蛋白质间的相互作用等等。基于不同的分析内容可以采用不同的蛋白质组学分析技术和分析策略。质谱技术是蛋白质组学分析最常用的技术之一。目前，基于质谱的蛋白质组学分析策略主要包括有自下而上蛋白质组学和自上而下蛋白质组学。在自下而上的蛋白质组学中，蛋白质在进入质谱分析之前需要先被消化成肽段，常见的非标记和标记的定量蛋白质

组学分析

“蛋白质组学(Proteomics)一词，源于蛋白质(protein)与基因组学(genomics)两个词的组合，意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”，即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。” 1995年（也有1994，1996年之说）Marc Wikins首次提出蛋白质组(Proteome)的概念1，1997年，Peter James （就职于有欧洲MIT之称的瑞士联邦工学院）又在此基础上率先提出蛋白质组学的概念2。基因组学和蛋白质组学的概念又进一步催生了N多的各种各样的

生物药氨基酸组成分析

氨基酸分析可以对蛋白质（多肽）类药物氨基酸的组成成分及含量进行测定，并且可以对蛋白质（多肽）类药物中存在的非典型氨基酸进行鉴定。氨基酸组成分析是蛋白质全测序前的必要步骤，同时氨基酸组成分析能够为确认蛋白质一级结构提供有力佐证。百泰派克基于氨基酸衍生技术和HPLC高效液相色谱分析，提供高效精准的蛋白质（多肽）药物氨基酸组成成分分析服务。服务主要包含两个重要步骤：1）对蛋白质及多肽样品进行水解，将他们水解

靶向脂质组学

脂质是疏水性或两亲性的小分子，包括脂肪、蜡、甾醇、脂溶性维生素（如维生素A、维生素D、维生素E和维生素K）、单甘酯、双甘酯和磷脂。脂质在生物生理学中的关键作用不仅体现在能量储存和细胞膜的结构成分上，还体现在信号转导、膜转运和形态发生上。脂质组学分析工作流程靶向脂质组学百泰派克生物科技配备先进的串联质谱测定脂质成分的方法、强大的生物信息分析系统和经验丰富的数据分析及技术人员，可为您提供定制化靶向脂质组学

代谢组学

代谢组学（Metabolomics）是在后基因组学时代兴起的以代谢组为研究对象的一门跨领域科学，旨在研究生物体、器官、组织甚至单个细胞受外界刺激、病理变化以及基因突变等产生的全部小分子代谢物成分及其动态变化，以揭示生物体响应不同层面变化的分子机理。代谢组学的研究内容主要就是对机体代谢网络中产生的小分子代谢物质进行定性定量鉴定。进行代谢组学分析的实验流程主要包括代谢物样本提取与分离、检测与鉴定、数据处理与生物学

pull down和免疫共沉淀的区别

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）可在体外检测两种蛋白质之间特定相互作用的存在。Co-IP在非变性条件下裂解细胞，保留了许多细胞内蛋白质相互作用。如果蛋白质 X 能与抗体特异结合，那么与蛋白X相互结合的蛋白Y会通过蛋白X与抗体的特异性识别一起沉淀下来。通过研究蛋白质 Y，可以确认蛋白质 X 和 Y 之间的相互作用。在Co-IP分析中，诱饵蛋白和猎物蛋白呈天然构象状态，其相互作用发生在体内，受外部影响较少，且不需