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  • Co-IP质谱分析

    Co-IP质谱分析

    Co-IP质谱分析-详情Co-IPCo-IP(Co-Immunoprecipitation)免疫共沉淀技术,是一种基于抗体与抗原特异结合的原理发展起来的用于研究体内蛋白质相互作用的经典方法。该技术使用非变性剂裂解细胞,保留细胞中蛋白质A-蛋白质B间的相互作用,再将其与蛋白A的专一性抗体混合,此时抗体会与蛋白A结合使其沉淀,同时蛋白B也被共沉淀下来。相互作用的蛋白质种类和数量可以通过后续的质谱分析进行鉴定,即Co-IP质谱分析。Co-IP质谱分析可以用

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  • Label Free蛋白定量

    Label Free蛋白定量

    Label Free蛋白定量-详情Label Free蛋白质是生命物质的承担者,生物体的组织或细胞内的蛋白质种类和含量的变化与其生命机能有着密切的联系。定量蛋白质组学把一个细胞、组织或生命体中所有的蛋白质或一个混合体系中(通常为体外)所有的蛋白质作为研究对象,对其进行精确的定量和鉴定,用于揭示生命体某项生命活动过程中蛋白质的变化。定量蛋白组学技术包括标记和非标记两类,Label Free是一种非标记蛋白质定量技术,基于液相色谱

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  • 抗体甲硫氨酸氧化翻译后修饰

    抗体甲硫氨酸氧化翻译后修饰

    抗体甲硫氨酸氧化翻译后修饰-详情甲硫氨酸又称蛋氨酸(Met),其与半胱氨酸是仅有的两种天然含硫氨基酸,硫原子在催化、金属结合、氧化还原调节以及其他翻译后修饰中起到十分关键作用。抗体甲硫氨酸氧化是指抗体蛋白中的甲硫氨酸残基发生了氧化,是上百种翻译后修饰类型中的一种,这种氧化反应是可逆的,抗体蛋白甲硫氨酸的氧化和去氧化修饰对调节体内动态平衡和信号转导具有重要意义,在阐明关键蛋白/多肽的功能方面也具有特别的

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  • Edman测序

    Edman测序

    Edman测序-详情Edman测序原理Edman测序又称Edman降解法测序,是由埃德曼在上世纪50年代创立的用于测定蛋白质一级结构的方法。Edman测序基本原理是将蛋白多肽的N端氨基酸用化学方法依次断裂,每次只断裂一个氨基酸,通过高效液相色谱(HPLC)分析断裂后氨基酸片段,再将少了一个氨基酸的多肽链回收,重复进行以上操作,直到zuì后鉴定出整条多肽链的氨基酸排列顺序。Edman测序技术Edman测序技术每一次循环只能鉴定一个氨基酸,大致

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  • 蛋白质圆二色谱分析

    蛋白质圆二色谱分析

    蛋白质圆二色谱分析-详情圆二色谱圆二色谱也称圆二色光谱,是一项依据圆二色性(circular dichroism,CD)发展而来的分析技术。圆二色性是指当平面偏振光经过光活性物质时,由于光活性物质对左、右圆偏振光的吸收不同,导致左、右圆偏振光变成椭圆偏振光的现象。大多数具有活性的生物大分子由于其不对称的空间结构都具有光学活性,均可作为圆二色谱研究的对象。蛋白质圆二色谱分析圆二色谱分析利用光活性物质(如有机化合物、生物

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  • 串联质谱鉴定蛋白质

    串联质谱鉴定蛋白质

    串联质谱鉴定蛋白质-详情串联质谱鉴定蛋白质原理串联质谱通过检测在质谱中获得的肽段碎片的分子质量来鉴定蛋白质,鉴定内容包括蛋白质的分子质量、蛋白质或多肽一级结构以及修饰位点等。经过酶解的肽段在质谱仪中按照一定的规律解离成不同系列的离子,通过分析不同系列相邻离子的质量差等质谱数据推算氨基酸的质量及序列,进一步分析得到蛋白或多肽的分子质量和结构等信息。串联质谱鉴定蛋白质技术蛋白质串联质谱鉴定技术基于肽段

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  • 抗体药物质量分析

    抗体药物质量分析

    抗体药物质量分析-详情抗体-药物偶联物(ADC)是一种新兴的生物治疗药物,它利用多种组织特异性抗体结合一系列接头设计,使细胞毒性药物在肿瘤附近能够运输和选择性释放,选择合适的靶标、单克隆抗体、细胞毒性有效载荷以及抗体与有效载荷连接的方式是ADC安全性和有效性的关键决定因素。抗体药物质量分析就是对影响抗体药物药效的关键质量属性进行鉴定,主要包括结构(分子量、一级序列、二级结构等)、寡糖分布、异质性(分子大小

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  • Shotgun蛋白质鉴定

    Shotgun蛋白质鉴定

    Shotgun蛋白质鉴定-详情Shotgun蛋白质鉴定原理Shotgun(鸟枪法)蛋白质鉴定基于质谱技术对混合体系中的蛋白质进行定性鉴定。其基本原理为利用液相色谱分离经酶解的肽段,被分离的肽段在质谱仪中解离成带电荷的离子,通过串联质谱分析获得相应的质谱数据,利用生物信息学软件结合相应蛋白质数据库质谱数据进行分析,从而实现蛋白质的鉴定。Shotgun蛋白质鉴定技术相比传统的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)鉴定技术来说,Shotgun

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  • 抗体重链和轻链的测序

    抗体重链和轻链的测序

    抗体重链和轻链的测序-详情B细胞免疫球蛋白序列的高通量测序已成为研究抗体发现、疫苗效力研究和其他医疗应用中的免疫球蛋白序列变化的有力工具。抗体重链和轻链的测序可以从直接和间接两个角度解决,对于可获得杂交瘤、噬菌体展示、酵母菌展示或单细胞筛选的情况而言,可以通过对B细胞的转录子或DNA测序获得编码抗体轻重链的RNA或DNA序列,再通过遗传物质的中心法则推导出抗体的氨基酸序列。百泰派克生物科技基于分辨率zuì高的质

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  • GST pull-down实验

    GST pull-down实验

    GST pull-down实验-详情GST pull-down实验原理Pull-down(拉下实验)是一种体外亲和纯化蛋白的技术,Pull-down技术利用被亲和试剂标签(如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素)标记的已知的蛋白特异性识别混合体系中的配体蛋白,以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的,是体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。当诱饵蛋白被谷胱甘肽S-转移酶(GST)标记时进行的Pull-down实验,称为GST pull-down实验,也称GST pull-do

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  • 空间代谢组学

    空间代谢组学

    空间代谢组学-详情空间代谢组学是迅速兴起的组学研究的一个新领域,专注于在细胞、组织、器官和生物体的空间环境中检测和解释代谢物、脂质、药物和其他小分子。空间代谢组学由生物学和医学中对原位表征生物现象的强大且不断增长的需求以及zuì近揭示的新陈代谢在健康和疾病中的关键作用所推动。该领域涉及各种生物医学问题,包括肿瘤分子微环境、体内平衡和免疫治疗期间免疫细胞的功能、宿主和微生物群之间的相互作用及其对炎症的

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  • 氨基酸序列测定

    氨基酸序列测定

    氨基酸序列测定-详情氨基酸序列测定氨基酸序列指蛋白质或多肽分子的氨基酸排列顺序,是蛋白质一级结构的一部分,在很大程度上决定了蛋白质或多肽的高级结构和生物学功能。因此,氨基酸序列测定有助于研究功能蛋白或活性多肽作用的机理,也为人工合成活性多肽提供了依据。氨基酸序列测定方法氨基酸序列测定方法主要包括传统的Edman降解测序法和质谱法:传统的Edman降解测序法操作较繁琐,不能对N末端封闭或修饰的序列进行测定。基于

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  • 磷酸化label-free

    磷酸化label-free

    磷酸化label-free-详情磷酸化是一种快速、动态和可逆的翻译后修饰,可调节蛋白质功能的多样性。识别蛋白质磷酸化的zuì有效策略是基于质谱(MS)的方法。由于其高通量和灵敏度,基于MS的方法已成为磷脂组学领域的黄金标准。磷酸化Label Free即非标记定量(Label Free Quantitation,LFQ)磷酸化蛋白质组学,其利用基于质谱的非标记定量技术研究磷酸化蛋白质组,可实现磷酸化蛋白质组的定性和定量鉴定。随着离子淌度维度的出现,质

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  • IP与Co-IP

    IP与Co-IP

    IP与Co-IP-详情IP技术IP(Immunoprecipitation)免疫沉淀技术,是一种基于抗体和抗原特异性结合的原理开发的用来检测、分离、纯化蛋白质以及研究蛋白互作的方法。免疫沉淀技术通过结合抗体蛋白的磁珠,将细胞裂解液或组织提取液等蛋白混合体系与磁珠进行孵化。混合体系中的目标蛋白与磁珠上的抗体蛋白实现特异性结合,再通过离心或洗脱去掉没有与抗体蛋白结合的杂蛋白,将目标蛋白分离出来。通过与其他技术(如质谱)结合可以鉴定

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  • 差异蛋白质组学

    差异蛋白质组学

    差异蛋白质组学-详情差异蛋白质组学差异蛋白质组学是蛋白组学的一个分支,蛋白组学研究的是一个体系的所有蛋白质,而差异蛋白质组学旨在寻找和鉴定不同样本或不同状态下的同一样本间蛋白组的差别和变化。生物体不同生长、发育及生理过程中,蛋白质种类和水平也不尽相同,对这类蛋白质组的组成和含量进行研究,即差异蛋白质组研究,可以揭示生命活动的本质,如:细胞调控机理、细胞应激反应途径等。差异蛋白质组学研究方法常用的差

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  • 磷酸化与非磷酸化蛋白的鉴定

    磷酸化与非磷酸化蛋白的鉴定

    磷酸化与非磷酸化蛋白的鉴定-详情蛋白质磷酸化是调节蛋白质功能所需的常见翻译后修饰,在细胞中很常见,对于蛋白质分子的激活或失活是必需的,特别是在影响代谢途径或过程的酶中很常见,这也使得磷酸化蛋白质的研究得到越来越多的关注,磷酸化蛋白研究的内容主要包括磷酸化蛋白的鉴定、水平以及作用等,其中,磷酸化蛋白的鉴定是需要shǒu要解决的问题。磷酸化蛋白的鉴定与天然蛋白(非磷酸化蛋白)的鉴定在内容和方法上都存在差异

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  • 氨基酸成分分析

    氨基酸成分分析

    氨基酸成分分析-详情氨基酸成分分析主要研究蛋白或多肽的氨基酸组成和含量,是多肽和蛋白研究中zuì基本的内容之一。氨基酸是组成生物大分子蛋白质和活性多肽的基本单位,也是维持生物体正常生命活动所必需的物质。此外,氨基酸的成分和含量还影响一些药用物质的功效以及可食用产品的口感和营养价值,氨基酸成分分析已广泛应用于各种食用、药用物质的氨基酸组成和含量研究。目前主要通过氨基酸自动分析仪和高效液相色谱法对多肽或

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  • 磷酸化组学与rna-seq联合分析

    磷酸化组学与rna-seq联合分析

    磷酸化组学与rna-seq联合分析-详情随着生命科学研究的发展需要,单一的组学分析已不能满足当前的需求,多组学技术由此应运而生。多组学联合分析将两个或两个以上的组学数据整合起来,寻找连接组学之间的关键点,进行网络状的分析,对机体的调控网络和通路进行全面的研究。磷酸化蛋白组学和RNA-seq都是通过研究生物学规律和机制过程进而研究基因表达动态调控的重要工具,将这两个组学的数据进行整合分析,不仅能揭示转录组和蛋白组

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  • 组蛋白修饰位点检测

    组蛋白修饰位点检测

    组蛋白修饰位点检测-详情组蛋白修饰位点检测组蛋白(histones)存在于高等真核生物体细胞染色质中,因富含精氨酸和赖氨酸而呈碱性,可与带负电荷的双螺旋DNA结合成DNA-组蛋白复合物。在组蛋白酶的作用下,组蛋白会发生不同的修饰,如:甲基化、乙酰化、磷酸化、腺苷酸化、泛素化、ADP核糖基化等。组蛋白修饰在一定程度上会导致转录激活或基因沉默,从而调控基因表达,影响免疫系统和免疫反应,甚至导致肿瘤等疾病的发生。因此,对

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  • 硫巯基化修饰

    硫巯基化修饰

    硫巯基化修饰-详情硫巯基化(S-巯基化,S-sulfhydrate)是一种新发现的在靶蛋白特定半胱氨酸残基上发生的蛋白质翻译后修饰,其通过改变靶蛋白的局部构象和zuì终活性参与广泛的细胞功能和代谢途径,S-巯基化作用被认为介导了由H2S引发的大多数细胞反应。通过在活性半胱氨酸残基中产生氢过硫化物部分(-SSH)或多硫化物,介导由H2S诱导的大部分细胞功能,使与H2S成为向NO和CO一样的气体递质家族中的新成员。百泰派克生物科技采用The

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