T7 DNA聚合酶

分子量：由2个亚基组成，804kDa多肽（T7噬菌体基因5表达产物）和12kDa硫氧还蛋白（大肠杆菌trxA基因表达产物）

来源：两个大肠杆菌菌株，一个菌株含有T7噬菌体克隆基因5，另一个菌株含有大肠杆菌克隆基因trxA
浓度：10u/ul
活力定义：在37°C条件下，30分钟内能使10 nmol 的脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量
酶活性分析混合物：40mM Tris-HCL(PH7.5), 1mM DTT, 10mM MgCL2, 0.1mg/ml BSA, 0.033mM各种dNTP,0.4MBq/ML(3H)-dTTP和0.5mM碱性变性的牛胸腺DNA
保存缓冲液组分：20mM 磷酸钾(PH7.4), 0.1mM EDTA, 1mM DTT和50%(v/v)甘油
10×反应缓冲液：400mM Tris-HCL(PH7.5，25℃), 100mM MgCL2, 10mM DTT
抑制剂：金属螯合剂，修饰试剂（无水醋酸和N-乙基顺丁烯二酰亚胺可使3'→5' 外切核酸酶失活，但不影响聚合酶活性
失活：75℃加热10分钟
质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染
使用注意：37℃分析时需要短时间孵育
性状：悬浮液，重组酶。T7 DNA聚合酶是一种模板依赖型DNA聚合酶，催化5'→3'方向的DNA合成。该DNA聚合酶具有高持续合成能力，可持续合成长片段DNA。该酶对单链和双链DNA具有3'→5'外切核酸酶活性
用途：生化研究。除去残留的基因组DNA，纯化共价闭环的DNA分子；长片段引物延伸反应；DNA 3'-末端标记；定点突变位点的链延伸反应；DNA 5'-突出点位补平；第二链cDNA合成；原位检测凋亡相关DNA片段