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MKN-1人胃癌细胞智立中特细胞系

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  • 发布时间:2023-08-02产品供应时间:长期有效

所在地:中国湖北武汉市

企业类型:个体经营

公司地址:湖北省武汉市东湖高新开发区软件新城健康智谷D2栋5楼

联系人:肖素素 (女士)
手机:18907133396
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企业信息
  • 智立中特(武汉)生物科技有限公司
  • [免费会员1年] 信用度:0级
  • 会员级别:普通会员 第1年 信用度:0级
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  • 联系人:肖素素(女士) 经理
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  • 注册资金:500人民币
  • 企业规模:1-49人
  • 企业类型:个体经营
  • 经营模式:制造商,贸易商
  • 经营范围:微生物菌种,质粒载体,细胞系,ATCC菌种
  • 产品详情
  • 联系方式
  • 品牌:
  • 所属分类:科研试剂 » 细胞生物学 » 细胞、细胞株
  • 产品型号:zl-057130
  • 产品规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
  • 计量单位:瓶
  • 最小起订量:0瓶
  • 供货总量:0瓶
  • 发货期限:自买家付款之日起15天内发货

MKN-1人胃癌细胞由SAkiyama建立,源于一位35岁患有印戒细胞癌的女性的胃淋巴结。

细胞特性

1)来源:胃癌

2)形态:上皮细胞样,贴壁生长

3)含量:>1x10^6

4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

细胞接受后的处理:

1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。

4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。

5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

细胞用途:仅供科研使用。

细胞培养操作规程,供参考

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。

3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。

4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。

注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例:

1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2,4min1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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关键词:MKN-1人胃癌细胞智立中特细胞系,供应,科研试剂,细胞生物学,细胞、细胞株
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