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超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒酶标板法

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超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒

(A002-192T 酶标板法)

 

一.测定原理

该方法利用NADH-PMS-NBT为超氧阴离子(O2·-)生成系统,超氧阴离子清除剂能减少NBT的蓝色。通过检测560nm处吸光值可判断体系中还原物质的还原能力。

二.试剂组成

试剂一:液体50mL×1瓶;

试剂二:液体100μL一瓶;

试剂三:粉剂一支;

试剂四:粉剂一支;

试剂五:1mg/mL芦丁标准品,100μL。

三.储存条件及有效期

试剂盒-20℃可保存3个月。

四.试剂的配制

试剂二工作液:加入10mL试剂一,充分摇匀,现配现用,注意避光;

试剂三工作液:加入10mL试剂一,充分摇匀,现配现用,配好后冰上保存,2h内使用

试剂四工作液:用50mL双蒸水溶解,摇匀后,取1mL,加入9mL试剂一,现配现用注意避光,配好的试剂请于2小时内用完

试剂五:阳性对照,按需使用,-20℃保存。

五.操作步骤

 

空白孔1

测定孔

对照孔2

试剂一(μL)

50

 

50

试剂二工作液(μL)

50

50

50

试剂三工作液(μL)

50

50

 

样品(μL)

 

50

50

                                                                      充分混匀

试剂四工作液(μL)

50

50

50

 

充分混匀,室温避光静置5min使之充分反应。560nm处采用酶标仪测定吸光值。

 

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