原代细胞培养实验

材料：动物组织块 无菌操作注意事项1、操作前洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦拭。2、点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3、操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4、不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布

小谈流式细胞术检测细胞凋亡

小谈流式细胞术检测细胞凋亡 当然对于现有的凋亡检测试剂并没有满足于整体凋亡情况的反映,一般的试剂会结合碘化丙啶(propidine iodide, PI)进行更细层面的检测。PI是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞细胞膜一般会发生破裂,此时PI能够细胞膜进入到细胞核内,嵌入到DNA中,使细胞核释放红色荧光。对于实验结果首先我们需要在细胞自身光散射特性方面进行评判。凋亡细胞形态上的改变影响它们的光散

细胞生物学实验----细胞培养

细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。细胞的生长需要营养环境,用于维持细胞生长的营养基

细胞----稳定株筛选【方法】

筛选出该基因的过表达或者RNA干扰的稳定细胞系会给您的实验带来极大的便利。有了稳定细胞系,后期的Co-IP或者Pull-Down实验会非常便利;稳定表达重组荧光蛋白的细胞系可以让您动态的观察分子在细胞中的运动。 构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin

通过流式细胞术检测细胞含量

CD4+和CD8+含量高低代表了什么？通过流式细胞术如何检测细胞含量？CD4和CD8细胞 白细胞又称为免疫细胞( immune ell),包含淋巴细胞和吞噬细胞等,其中淋巴细胞是免疫系统的基本成分。淋巴细胞包含T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞( CD3-CD19+)、NK细胞( CD3-CD16+CD56+), 其中T淋巴细胞是淋巴细胞的主要组成部分。T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞,“thymus dependent lymphocyte”简称T细胞CD3+淋巴细胞指的是全T淋巴细胞,包含CD3+CD4+

原代细胞分离培养来源有什么？

MDL可提供将动物机体的各种组织从机体中取出，采用酶消化、机械法等途径使其分散成单细胞，并置于合适的培养基中培养。细胞得以存活、生长、繁殖。原代细胞相比较细胞系更能反应机体原有的特性，用于科学研究时更具有针对性和说服力。 结缔组织来源(成纤维、巨噬、脂肪组织、软骨、骨、破骨、血液等)细胞分离培养。

手把手教你操作肿瘤干细胞成球实验

肿瘤干细胞成球实验 肿瘤干细胞是一群既具有自我更新能力又具有较强的侵袭迁移的细胞，对肿瘤的存活、增殖、转移及复发有着重要作用。肿瘤细胞的成球实验（成球大小及数目）是衡量肿瘤细胞干性的金标准。成球能力是肿瘤干细胞体外鉴定的一个重要方法。其判断的是单个细胞在合适的条件培养基中自我更新的能力，一般用细胞球形成效率（SphereFormation Efficiency，SFE）表示。 SFE的计算方法：SFE=每孔中直径大于75um的细胞球的个数

细胞凋亡检测技术

细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。人体内的细胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡则是病理性的，有关细胞死亡过程的研究，已成为生物学、医学研究的一个热点。它不仅可以用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究，还能应用于临床诊疗、新药研制、生物制

外泌体提纯【超全方式】

外泌体提纯方式 外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现， 1987年Johnstone将其命名为"exosome"。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液

细胞生物实验服务

MDL细胞生物学平台有超净工作台、细胞培养箱、冰箱、液氮罐、显微镜等基础设施，具有独立的无菌操作间，拥有风淋装置，另外配备了荧光倒置显微镜、活细胞工作站，可集细胞培养、电生理记录、形态观测和荧光信号记录为一体，模仿活细胞的生活环境，实现细胞的长时间培养、连续观察。 MDL可以为您提供包括原代细胞分离培养与鉴定在内的细胞培养相关的实验服务。可以检测细胞的增殖和细胞克隆形成能力，肿瘤细胞的周期凋亡和迁移侵袭

细胞生物实验技术服务

MDL自有细胞实验平台，可以为您提供包括原代细胞分离培养与鉴定在内的细胞培养相关的实验服务。可以检测细胞的增殖和细胞克隆形成能力，肿瘤细胞的周期凋亡和迁移侵袭，功能细胞的MDA和GSH等代谢，细胞体积和形态观察、细胞内酶活性、细胞膜受体和表面抗原等重要参数。MDL细胞生物学平台有超净工作台、细胞培养箱、冰箱、液氮罐、显微镜等基础设施，具有独立的无菌操作间，拥有风淋装置，另外配备了荧光倒置显微镜、活细胞工作站，

Transwell细胞迁移实验

实验介绍

细胞外包及外泌体一系列服务

外泌体系列服务 MDL细胞生物学平台有超净工作台、细胞培养箱、冰箱、液氮罐、显微镜等基础设施，具有独立的无菌操作间，拥有风淋装置，另外配备了荧光倒置显微镜、活细胞工作站，可集细胞培养、电生理记录、形态观测和荧光信号记录为一体，模仿活细胞的生活环境，实现细胞的长时间培养、连续观察。可以为您提供多种原代细胞分离培养与鉴定服务，细胞状态好，无污染。 我公司拥有熟练专业的实验人员，备有大量常见的抗体，可快速测

生物细胞划痕

特点:2. 非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。4. 研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。联系我们：【热线】19931682702

细胞转染技术详解

细胞转染技术详解一、细胞传代1.试验准备：200 ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。2.弃掉培养皿中的培养基，用1 ml的PBS溶液洗涤两次。3. 用Tip头加入1 ml Trypsin液，消化1分钟（37℃，5%CO2）。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。4.加入1 ml的含血清培养基终止反应。5.用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。6. 将培养液装入离心管中

平板克隆【实操干货】

平板细胞克隆形成试验 克隆形成试验可反映细胞群体依赖性和增殖能力。一般细胞在体外增殖六代以上,其后代形成的细胞群体称为细胞集落或克隆。每个克隆由单一细胞而来,含有50个以上细胞,大小在0.3-1mm之间。通过克隆形成可检测各种理化因素对细胞克隆形成能力的影响。平板克隆形成试验可检测贴壁细胞细胞的克隆形成能力,软琼脂集落形成试验可检测非锚着依赖生长的细胞,如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系等。基本步骤: 1、取

细胞污染检测方法

图1只观察到细胞的细胞核,说明细胞没有被支原体的污染; 可见细胞核外与细胞表面会出现蓝色萤光小点或是丝状点,其形状各异,与细胞共同被染成不规则的点状物,说明细胞被支原体污染。 MDL服务项目动物实验相关、WB、IP和Co-IP服务、蛋白质纯化、蛋白质双向电泳、明胶酶谱、细胞增殖、细胞培养、细胞周期凋亡、平板克隆、免疫荧光、免疫组化、常规及特殊染色、包埋切片爬片、定量pcr、elisa检测服务、普通生化试剂盒检测、全自动生化检

2种细胞集落形成实验

2种细胞集落形成实验细胞集落形成实验是检测培养细胞增殖能力的有效方法之一,通过计算集落形成率(colony forming efficiency),来测定测试细胞的增殖能力。 实验前准备:6孔板、吸管、枪头、血球计数板、基质胶等放入超净工作台消毒30min。 1、平板集落形成实验(适用于贴壁细胞) ①取出贴壁率90%的细胞(处于对数生长期),消化离心,重悬细胞并进行细胞计数。②6孔板种板:实验分组,每个孔中加入1000个细胞,放入CO2培养箱培养。③培养1

RNA

在生物遗传信息传递的过程中，中心法则是所有有细胞结构的生物所遵循的法则，其核心内容是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息转录和翻译的过程。在该过程中，RNA起到了承上启下的作用，本文就RNA的种类作一汇总，以便更好地加以区分。细胞中仅有少数转录生成的RNAs可作为蛋白质合成的模板，称为编码RNA（coding RNA），主要包括mRNA，其余的RNA则被称为非编码RNA（non-coding RNA, ncRNA），这是RNA的